원리 및 특성
<관련자료> (동영상 및 사이트 링크)
1. ZEISS Webinar: LSM 880 with Airyscan - Revolutionize Your Confocal Imaging
2. ZEISS LSM 880 with Airyscan: Beam Path and Principle of Airyscanning
3. 현미경 기초부터
4. ZEISS Webinar: LSM 800 with Airyscan – Your Compact Confocal Power Pack
공초점현미경은 레이저를 광원으로 형광을 이용한 광학현미경의 일종으로 시료를 형광염료로 염색 및 표지하여 조직이나 세포 내 구조물이나 소기관의 형태적 변화, 고분자, 섬유, 입자, 투과성 박막, 에멀전 등의 구조나 형태를 관찰한다. Blade, ion beam 및 laser로 물리적 절단 없이 시료에서 발광되는 형광 빛을 이용하여, 광학절단된 단면 이미지를 만들 수 있고 이를 조합하여 3D을 형상화할 수 있다. 또한 시료 내부에 약물, 온도, 유전자변이 등 특정 외부자극을 주어, 형태나 내부 상태 변화 등을 실시간으로 라이브 이미지화 할 수 있다.
본 장비의 장점은 기존의 공초점현미경보다 1.7배 해상도가 증가하였고, bleaching 및 광독성을 최소화하여 초고해상도 이미징이 가능하다.
규격
제조사 : Carl zeiss (Germany)
모델명 : LSM 880 with Airyscan
세부 사양
1. Laser module : 405㎚, 458-488-514㎚, 561㎚, 594㎚, 633㎚
2. Scan module : - 34 channel detectors (Spectral)
2ea PMT, 1ea 고감도 GaAsP
- Resolution : 8192 x 8192 pixels
- Lateral resolution of 140nm, Axial resolution of 400nm
- Speed :13fps(512×512)~430fps(512×16)
3. Standard software :
- Z-stack, Lambda scan, Multitracking Tiles & Positions, Physiology/Ion concentration, ROI bleach, 3Dvisualization
4. Microscope : Inverted type
- Objective 5×, 10×, 20×, 40×, 63×, 100×, DIC
- Fluorescence system, Dichromatic
Blue, Green-BP, Green-LP, Red filter
5. Live cell CO2 chamber system
□ 부대장비
1. 동결절편기
모델: LEICA CM1850
적용(응용)분야
1. 형광염색에 의한 세포내 발현된 단백질 위치 분석, 세포구조등 관찰
2. DIC(differential interference contrast) 관찰 및 광학 이미지획득
3. Confocal 이미지 관찰(광학절단으로 내부관찰), 다중형광 이미지획득
4. CO2 chamber system으로 세포내의 이온 변화, 신경전달물질 측정 등의 생체반응 실시간분석가능
5. Stereo 이미지 분석(3,4D, 파노라마영상 등)
6. 길이, 면적, 분포 등의 이미지 분석
□ 분석가능 fluorophore
Excitation 적용 파장 : 405㎚, 458-488-514㎚, 561㎚, 594㎚, 633㎚
□ 시료준비
- Fixed시료: 0.17㎜ cover glass
- Live시료:
0.17㎜ optical slip bottom type culture dish (Φ 30~60㎜, 76×26×1㎜)
□ 동결 절편
- 전용blade와 freezing medium 제공
LSM 880 with AiryScan Brochure.pdf